产品货号:
GL0503
中文名称:
ATPase染色液(钙钴法)
英文名称:
产品规格:
5×50mL
发货周期:
1~3天
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三磷酸腺苷酶(adenosine triphosphatase,ATPase)是一种催化ATP水解的酶,三磷酸腺苷酶根据所用激活剂、抑制剂以及酶定位的不同分为膜性三磷酸腺苷酶、肌球蛋白三磷酸腺苷酶、线粒体三磷酸腺苷酶等,ATPase能水解三磷酸腺苷为磷酸腺苷和磷酸,此酶只作用于磷酸与磷酸之间的高能键,因而释放大量能量。
三磷酸腺苷酶水解三磷酸腺苷为二磷酸腺苷和磷酸,磷酸根与钙离子结合为磷酸钙沉淀,再依次被置换为磷酸钴和硫化钴,最终产物为黑色硫化钴沉淀。
组分 | 规格 | 保存条件 |
试剂(A):钙盐溶液 | 50mL | RT |
试剂(B):ATPase孵育液 | 50mL | 4℃避光 |
试剂(C):硝酸钴溶液 | 50mL | RT |
试剂(D):中性福尔马林 | 50mL | RT |
试剂(E):ATPase硫化溶液 | 2×1mL | 4℃避光 |
试剂(F):ATPase对照液 | 10mL | 4℃避光 |
保存:按标签指示条件保存,有效期6个月。
- 恒温箱、水浴锅
- 蒸馏水、中性福尔马林固定液
- ATPase孵育液、ATPase硫化液易失效,最好分成小分储存,一经开启立即使用。
- ATPase硫化溶液具有腐蚀性和刺激性气味,应小心操作。
- 冰冻切片染色时,应减少切片在室温暴露的时间。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 冰冻切片直接入蒸馏水。
- 入钙盐溶液中37℃水浴5min。
- 入ATPase孵育液孵育40min,蒸馏水洗1min。
- 入硝酸钴溶液孵育5min,入蒸馏水。
- 入中性福尔马林固定液室温固定2min,流水冲洗2min。
- 在上述过程中配制ATPase硫化工作液,即取试剂(E)用蒸馏水稀释50倍,即为ATPase硫化工作液,即配即用。
- 切片入ATPase硫化工作液,孵育2min。
- 流水洗10min后,入蒸馏水,甘油明胶封固。
酶所在阳性部位:黑色或棕黑色
此为可选操作。
- 取对照切片,用试剂ATPase对照液进行孵育,并与用ATPase孵育液孵育的切片进行比较。两者反应相同部位可能有非特异性磷酸(单酯)酶存在,两者不同部位才是ATP酶活性所在。
- 将切片入80℃蒸馏水10min,再与其他组织切片同时孵育,结果应为阴性。
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